操纵细胞悬浮液从斑马鱼肠道黏膜对理解肠炎

在水产养殖,feed-induced肠道粘膜的慢性炎症尤为常见,和肠道粘膜免疫屏障通常是第一个地方水生病原体,如病毒和细菌入侵。因此,研究鱼肠炎最近成为基本水生疾病研究的热点。

一套完整的肠炎使用斑马鱼研究系统以前研究所的研究人员研制出了中国科学院水生生物科学院水生生物研究所(IHB),包括肠道粘膜的成像免疫细胞和multi-omic分析大豆meal-induced肠炎(SBMIE)。食源性肠炎的斑马鱼模型被用于一系列的水产药物开发项目。然而,研究肠道粘膜免疫的细胞水平上需要一个方法论的突破相关的深入分析。

最近,夏小秦教授领导的研究小组从水生生物研究所创新从斑马鱼免疫细胞悬浮液的制备肠粘膜并开发了一个快速和简单的操作方法。该研究发表在免疫学前沿。

研究人员分离的免疫细胞在绒毛肌肉层的斑马鱼肠道反复吸量。与网格摩擦方法常用于养殖鱼类,吹的方法,这是由轻轻移液,导致更少的损失斑马鱼粘膜组织细胞的可行性。

使用流式细胞术结合荧光标记的免疫细胞的控制策略,研究人员可以准确地分离各种免疫细胞组在斑马鱼肠道粘膜免疫细胞群,包括中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞。斑马鱼品系贴上immunocytofluorescence用于隔离。发现通过流式细胞仪检测到细胞生存能力大大提高,粘附的细胞基本上都是免费的,和荧光表达和细胞形态学更好。

转录组的研究结果表明,免疫细胞标记基因的表达在孤立的细胞组明显高于肠组织本身,和粘蛋白基因表达热图显示内部粘蛋白基因主要表达在孤立的细胞群体。浓缩的基因的差异表达分析(度)还透露大量的孤立的细胞群的几种途径。

在分析各种类型的免疫细胞流式细胞术(荧光标记),研究人员发现,与网摩擦法相比,吹的方法可以显著提高免疫细胞的细胞悬液的产量来自肠道粘膜。的吹法的应用斑马鱼SBMIE肠炎模型表明,该方法能够准确地反映出enteritis-related免疫细胞的比例的变化,如中性粒细胞和巨噬细胞。

吹的方法可以应用于造成的粘膜屏障功能障碍的病理研究抗原和anti-nutritional因素,甚至功能成分添加到饮食,通过肠道吸收。