MicroRNA-146a在破骨细胞释放的胞外囊泡中含量丰富

今天，在第45届美国牙科研究协会年会上，美国佛罗里达大学的研究员Lexie Holliday将展示一项题为“MicroRNA-146a在破骨细胞释放的细胞外囊泡中丰富”的研究。AADR年会与加拿大牙科研究协会第40届年会同时举行。

Holliday和她的研究团队最近的数据表明，破骨细胞释放的细胞外囊泡(EVs)调节骨骼细胞体外。MicroRNAs是一种小的非编码rna，可以抑制目标mrna的翻译。ev可以将功能性microRNAs从它们的起源细胞运送到目标细胞。MicroRNA (miR)-146a由NF kappa B诱导，通过抑制TRAF6和IRAK1的翻译来抑制NF kappa B信号通路。破骨细胞需要持续的NF Kappa B信号来分化和吸收骨。在这项研究中，研究人员旨在识别破骨细胞衍生ev中的microrna，以确定骨重塑的潜在调节因子。

在本研究中，通过重组核因子κ b配体受体激活剂刺激RAW 264.7细胞产生破骨细胞。使用ExoQuickTM分离ev，通过透射电镜(TEM)进行阳性/阴性染色和观察，并通过Western blotting检测标准外泌体标记物。使用miRVana试剂盒从破骨细胞和破骨细胞前体中分离出microrna，并通过微阵列进行分析。利用SeraMiR外泌体RNA纯化试剂盒从ev中分离RNA，进行实时荧光定量PCR。

透射电镜显示ev的直径主要在30 ~ 70 nm之间，含有CD63和CD81外泌体标记。微阵列分析显示，Let-7b-5p和miR-146a在破骨细胞中的水平分别比前体高160%和210%。相比之下，MiR-689和miR-290在破骨细胞中分别降低至其前体水平的15%和3%。ev中很少检测到miR-689或miR-290。Let-7b-5p在破骨细胞中增加2倍。MiR-146a在ev中非常丰富，与前体相比，在破骨细胞ev中MiR-146a的水平高出21.1倍。MiR-146a在破骨细胞EVs中富集。

ev中miR-146a的释放可能会阻止破骨细胞NF κ B通路的抑制。富含mir -146a的ev可能调控成骨细胞或其他靶细胞。ev中的MiR-146a是破骨细胞存在的潜在生物标志物。